Alexa Fluor555

Alexa Fluor555-NHS水溶性红色荧光染料活性酯衍生物

AF555-NHS（Alexa Fluor 555-N-hydroxysuccinimide ester）是一种水溶性红色荧光染料活性酯衍生物，其核心为 Alexa Fluor 555 花青素染料，激发波长约 555 nm，发射波长约 565 nm。AF555-NHS 具有高量子产率、优良光稳定性及低背景荧光，广泛应用于蛋白质、抗体、寡核苷酸、多肽及纳米材料的荧光标记。其 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活性酯末端可与氨基（–NH₂）反应形成稳定的酰胺键，从而实现共价偶联。

AF555-NHS 的水溶性和高稳定性使其能够在生物体系中均匀分布，适用于体外标记、活细胞成像及多色荧光实验。其红色荧光信号具有良好的穿透性和低自发荧光干扰，适合复杂生物样品的分析。

二、化学组成与特性

Alexa Fluor 555 核心

多共轭花青素结构提供高亮度和长寿命荧光。

激发波长 555 nm、发射波长 565 nm，适用于红色荧光成像。

NHS 活性酯修饰

NHS 酯是一种高效亲电子化学基团，可与初级氨基反应生成酰胺键。

反应条件温和（pH 7–9），无需高温或强酸碱，保护生物分子结构。

偶联产物稳定，荧光性质不受影响。

水溶性与生物相容性

染料整体水溶性良好，可直接在 PBS 或水相体系中操作。

生物相容性高，适用于细胞内和体外标记实验。

三、制备方法概述

起始原料

Alexa Fluor 555 染料前体（含羧基或羟基功能化位点）。

N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和碳二亚胺类偶联试剂（如 DCC 或 EDC）。

有机溶剂如二氯甲烷（DCM）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）等。

活性酯化反应

在干燥有机溶剂中，将 Alexa Fluor 555 的羧基与 NHS、偶联剂混合。

在室温或低温条件下搅拌，使羧基活化为 NHS 酯。

反应一般持续数小时至一夜，确保羧基完全转化。

纯化步骤

通过硅胶柱层析或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的起始物、偶联剂及副产物。

使用适当溶剂体系保证染料稳定性，并收集纯化的 AF555-NHS。

储存与处理

活性酯对水分敏感，纯品应储存于干燥条件下，低温避光保存。

溶解操作一般采用无水有机溶剂，如 DMSO，避免水分导致水解失活。

产品名称：Alexa Fluor555-NHS

纯度：95%+

规格：mg/g

厂家：齐岳生物

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc